叠氮聚乙二醇活性酯,N3-PEG-NHS生物偶联与标记的步骤是什么?(聚乙二醇简介) 99xcs.com

【标题】N3-PEG-NHS

【介绍】

NHS-PEG-N3,N-羟基琥珀酰亚胺-聚乙二醇-叠氮是一种双功能的聚乙二醇衍生物。

它结合了N-羟基琥珀酰亚胺酯的高反应活性(与氨基反应)和叠氮基团的特异性反应活性(用于点击化学)。

聚乙二醇部分起到连接两个官能团、改善溶解性和生物相容性的作用。

NHS-PEG-N3结构分析:

NHS活性酯:能够与伯胺基团反应,形成稳定的酰胺键。

叠氮基团:与炔基发生点击化学反应,生成稳定的三唑环,适用于分子连接和靶向药物递送。

PEG链:提供良好的水溶性和生物相容性。

基本特性:

化学活性:

NHS酯端可在中性或弱碱性条件下与伯胺基团高效反应,形成稳定的酰胺键,适用于蛋白质、抗体或多肽的偶联。

叠氮基团可通过点击化学反应与炔基或DBCO等基团特异性结合,生成稳定的三唑环结构。

稳定性:NHS酯对水分敏感,需干燥避光保存,而PEG链增强了整体分子的稳定性和抗免疫原性。

【试剂图】

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【参数】

试剂名称:叠氮聚乙二醇活性酯;N3-PEG-NHS;Azide-PEG-活性酯

分子量:5000

外观:白色固体

纯度:95%+

规格:1mg、5mg、10mg

分散系数(PDI):小于等于1.05

溶解性:溶于大部分有机溶剂,溶于水。

储存条件:-20℃的干燥环境中,避光保存,避免频繁解冻和冷冻,现配现用。

N3-PEG-NHS生物偶联与标记的步骤

(一)NHS 酯与伯胺的偶联(共价连接 PEG-N3)

预处理生物分子:

目标生物分子需含有游离伯胺。将其溶解于 pH 7.5–8.5 的缓冲液,以维持胺基的反应性。

活化 N3-PEG-NHS:

N3-PEG-NHS 通常以固体形式储存于干燥环境。使用前溶解于无水有机溶剂,浓度建议为 1–10 mg/mL。

偶联反应:

将 N3-PEG-NHS 溶液逐滴加入生物分子溶液中,在 室温或 4°C 下搅拌反应 2–4 小时。

注:若反应效率低,可追加 N3-PEG-NHS并延长反应时间至 24–48 小时。

纯化:

通过透析、尺寸排阻色谱或离心去除未反应的 N3-PEG-NHS 及副产物。最终获得带有叠氮基团的修饰生物分子。

(二)叠氮基团(N3)的点击化学标记

与含炔基分子反应:

将上述 Protein-PEG-N3 与含有 DBCO或炔基的分子混合,在 pH 7–8 的缓冲液中室温反应 2–6 小时。

注:DBCO 与 N3 的反应为铜游离点击化学,无需金属催化剂,避免生物分子失活。

纯化与验证:

通过透析、HPLC 或凝胶电泳分离偶联产物,并通过质谱、紫外光谱或荧光检测验证标记效率。

【更多试剂】

4-Arm PEG-Chloride

8-arm-PEG-NH2

8-arm-PEG-COOH

8-arm-PEG-MAL

4-Arm PEG-GAS

4-Arm PEG-VS

4-Arm PEG-Vinylsulfone

FA-PEG-Tert / FA-PEG-Tert

DSPE-PEG-SP94(SFSIIHTPILPL)

8ARM-PEG-Thiol / 8ARM-PEG-Thiol

以上内容来自凯新生物小编小言,所有试剂仅供科研工业使用,非直接食用药用。感兴趣的伙伴可以留言谈论哟~~~